分光光度計(jì)是一種利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器，能夠?qū)⒊煞謴?fù)雜的光線分解成光譜線，在各種科學(xué)實(shí)驗(yàn)以及實(shí)地測量中發(fā)揮著重要的作用。
分光光度計(jì)檢定(測試)主要項(xiàng)目對分析結(jié)果的影響
1)波長準(zhǔn)確度
分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個(gè)吸收峰的波長。由于儀器的制造和調(diào)整誤差，單色光的實(shí)際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度，對波長準(zhǔn)確度要求允許寬些。但是，當(dāng)吸收峰寬度較小，而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直，此時(shí)波長準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。
2)透射比(吸光度)準(zhǔn)確度
很顯然，透射比或吸光度的誤差越大，測試結(jié)果的可信性越差，從而影響到測試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
3)雜散光
雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光，隨著樣品濃度的增加，雜散光的影響也隨之增大，將給分析結(jié)果帶來一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測器的靈敏度均明顯減弱，雜散光的影響更不能忽視。因此，雜散光的大小也是儀器性能的一項(xiàng)重要指標(biāo)。
使用與維護(hù)：
1)若大幅度改變測試波長，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測量。
2)指針式儀器在未接通電源時(shí)，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。
3)比色皿使用完畢后，請立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。
4)操作人員不應(yīng)輕易動燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。
5)WFZ800-DA、756型等分光光度計(jì)，由于其光電接收裝置為光電倍增管，它本身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大，因而可以用于檢測微弱光電信號，而不能用來檢測強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號漂移，靈敏度下降。針對其上述特點(diǎn)，在維修、使用此類儀器時(shí)應(yīng)注意不讓光電倍增管長時(shí)間暴露于光下，因此在預(yù)熱時(shí)，應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿，避免長時(shí)間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。
6)放大器靈敏度換擋后，必須重新調(diào)零。
7)比色皿的配套性問題。比色皿必須配套使用，否則將使測試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下;分別向被測的兩只比色皿里注入同樣的溶液，把儀器置于某一波長處，石英比色皿：220nm、700nm裝蒸餾水，玻璃比色皿：700nm處裝蒸餾水，將某一個(gè)池的透射比值調(diào)至100%，測量其他各池的透射比值，記錄其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范圍內(nèi)則可以配套使用，若超出此范圍應(yīng)考慮其對測試結(jié)果的影響。
故障及其排除方法
1)儀器不能調(diào)零?？赡茉颍?/p>
a)光門不能完全關(guān)閉。解決方法：修復(fù)光門部件，使其完全關(guān)閉。
b)透過率“100%”旋到底了。解決方法：重新調(diào)整“100%”旋鈕。
c)儀器嚴(yán)重受潮。解決方法：可打開光電管暗盒，用電吹風(fēng)吹上一會兒使其干燥，并更換干燥劑。
d)電路故障。解決方法：檢修電路。
2)儀器不能調(diào)“100%”?？赡茉颍?/p>
a)光能量不夠。解決方法：增加靈敏度倍率檔位，或更換光源燈(盡管燈還亮)。
b)比色皿架未落位。解決方法：調(diào)整比色皿架使其落位。
c)光電轉(zhuǎn)換部分老化。解決方法：更換部件。
d)電路故障。解決方法：調(diào)修電路。
3)測量過程中,“100%”點(diǎn)經(jīng)常變動。可能原因：
a)比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解決方法：用擦鏡紙擦干凈比色皿表面，然后將其安放在比色槽的左邊，上面用定位夾定位。
b)電路故障(電壓、光電接收、放大電路)，解決方法：送修。
4)數(shù)顯不穩(wěn)。可能原因：
a)預(yù)熱時(shí)間不夠。
解決方法：延長預(yù)熱時(shí)間至30分鐘左右(部分儀器由于老化等原因，長時(shí)間處于工作狀態(tài)時(shí)，也會工作不穩(wěn))。
b)光電管內(nèi)的干燥劑失效，使微電流放大器受潮。
解決方法：烘烤電路，并更換或烘烤干燥劑。
c)環(huán)境振動過大、光源附近空氣流速大、外界強(qiáng)光照射等。解決方法：改善工作環(huán)境。
d)光電管、電路等其它原因。
操作?注意事項(xiàng)：
1)比色皿架及比色皿在使用中的正確到位問題：
有些使用者對這個(gè)問題不夠重視，因操作不當(dāng)造成偶然誤差，嚴(yán)重影響分析結(jié)果。首先，應(yīng)保證比色皿不傾斜放置。稍許傾斜，就會使參比樣品與待測樣品的吸收光徑長度不一致，還可能使入射光不能全部通過樣品池，導(dǎo)致測試比準(zhǔn)確度不符合要求。其次，應(yīng)保證每次測試時(shí)，比色皿架推拉到位。若不到位，將影響到測試值的重復(fù)性或準(zhǔn)確度。最后,還應(yīng)保證比色皿的清潔度,延長其使用壽命。
2)干燥劑的使用問題。干燥劑失效將導(dǎo)致：
a)數(shù)顯不穩(wěn)、無法調(diào)“0”點(diǎn)或“100%”點(diǎn)(電路或光電管受潮)。
b)反射鏡發(fā)霉或沾污，影響光效率、雜散光增加。鑒于上述原因，分光光度計(jì)的放置地點(diǎn)應(yīng)遠(yuǎn)離水池等濕度大的地方、干燥劑應(yīng)定期更換或烘烤。
3)儀器的工作環(huán)境
應(yīng)避免陽光直射、避免強(qiáng)電場、避免與較大功率的電器設(shè)備共電、避開腐蝕性氣體等。
分光光度計(jì)的基本原理是:物質(zhì)在光的照射下會產(chǎn)生對光吸收的效應(yīng),而且物質(zhì)對光的吸收是具有選擇性的。各種不同物質(zhì)都具有其各自的吸收光譜。
因此不同波長的單色光通過溶液時(shí)其光的能星就會被不同程度的吸收,光能量被吸收的程度和物質(zhì)的濃度有一定的比例關(guān)系,即符合比耳定律。
在使用可見分光光度計(jì)前先了解一下的操作規(guī)程沒有錯(cuò)。
開機(jī)
1、開機(jī)前，檢查電源插座是否接上;
2、啟動電源開關(guān)，儀器顯示"723C"
3、儀器經(jīng)自測后，按"MODE"鍵后再按"2"鍵，儀器顯示"DATA"
基本使用方法
1、按"GO TO λ"鍵，輸入設(shè)定波長;
2、四個(gè)比色皿，其中R位置放置參比試樣，其余三個(gè)放入待測試樣。將比色皿放入樣品池內(nèi)的比色皿架中，蓋上樣品池蓋;
3、將參比試樣推入光路，按"ABS%"鍵，使儀器自動調(diào)零和置滿度;
4、然后將待測試樣推入光路，顯示試樣的吸光度值;
5、如果要想將待測試樣的數(shù)據(jù)打印出，只需按"START/STOP"鍵即可。
可見分光光度計(jì)的使用注意事項(xiàng)
每天使用結(jié)束后，應(yīng)仔細(xì)檢查樣品室內(nèi)是否有溶液溢出，若有溢出必須隨時(shí)用濾紙吸干;
儀器使用完畢，用防塵套罩住。
紫外可見分光光度計(jì) 紫外、可見分光光度計(jì)是一種常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室分析儀器?？蓮V泛應(yīng)用于無機(jī)物、有機(jī)物的定性、定量分析中，在科研、制藥、化工、環(huán)保、衛(wèi)生、防疫等領(lǐng)域中發(fā)揮重要的作用。有人說，紫外、可見分光光度計(jì)就是一把尺子一個(gè)天平，凡是有化驗(yàn)、分析的地方都能用得到它。 那么，如何評價(jià)一臺紫外、可見分光光度計(jì)的優(yōu)劣呢？ 首先，要考察它的外觀。試想，一臺外型呆板、做工粗糙的儀器，怎么可能是一臺先進(jìn)的儀器呢？
然后，我們探討一下會對儀器的使用有很大影響的幾個(gè)重要指標(biāo)：
1.光度準(zhǔn)確度：光度準(zhǔn)確度指實(shí)際測量的光度讀數(shù)值與真值之差。它是用戶對儀器的直接要求，每個(gè)用戶都必須重視。
2.雜散光：它指不應(yīng)該有光的地方有了光。這經(jīng)是光譜測量中誤差的主要來源。這個(gè)值當(dāng)然越小越好了
3.光譜帶寬：指從單色器射出的單色光譜線強(qiáng)度輪廓曲線的1/2高度處的譜帶寬度。表征儀器的光譜分辨率。按照比耳定律，光譜帶寬應(yīng)該是越小越好的，但是如果儀器的光源能量弱，光學(xué)傳感器的靈敏度低時(shí)，光譜帶寬小了，也得不到理想的測量結(jié)果的，所以，選擇和使用儀器時(shí)一定注意。
4.穩(wěn)定性：穩(wěn)定性是使用者較為關(guān)注的指標(biāo)之一。
5.噪聲：噪聲也是儀器的重要指標(biāo)之一。它表征儀器的做稀溶液的能力，這個(gè)指標(biāo)也是越小越好。
6.波長的準(zhǔn)確和重要性：儀器的每個(gè)值都是在一定的波長下測得的，如果所示的波長和實(shí)際波長偏差萬里，那么測出的值和真值的吻合度從何談起呢？可見這個(gè)指標(biāo)的重要性。 總之，這幾個(gè)指標(biāo)都是相互獨(dú)立又相互關(guān)系的，每個(gè)指標(biāo)對儀器的使用都有很大影響，希望大家在選購紫外、可見分光光度計(jì)時(shí)，多做比較，多做判斷，切實(shí)找到一個(gè)穩(wěn)定的好幫手。
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