在使用分光光度計時，我們必須要注意一些使用后的維護，保養(yǎng)，和一些基本使用注意事項，才能達到更好的使用效果。
分光光度計的使用維護：
1、使用的吸收池必須潔凈，并注意配對使用。量瓶、移液吸管均應校正、洗凈后使用。
2、取吸收池時，手指應拿毛玻璃面的兩側(cè)，裝盛樣品以池體的4/5為度，使用揮發(fā)性溶液時應加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈，晾干防塵保存。
3、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之間為宜。
4、測定時除另有規(guī)定外，應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用1cm石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰±2nm以內(nèi)，測幾個點的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度最大的波長作為測定波長，除另有規(guī)定外吸收度最大波長應在該品種項下規(guī)定的測定波長±2nm以內(nèi)。
5、供試品應取2份，如為對照品比較法，對照品一般也應取2份。平行操作，每份結(jié)果對平均值的偏差應在±0.5%以內(nèi)。
6、選用儀器的狹縫寬度應小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度值會偏低，狹縫寬度的選擇應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準，對于大部分被測品種，可以使用2nm縫寬。
7、單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內(nèi)不能拆開,為防止色散元件受潮發(fā)霉,必須經(jīng)常更換單色器盒干燥劑。
8、光電轉(zhuǎn)換元件不能長時間曝光,應避免強光照射或受潮積塵。
與傳統(tǒng)分光光度計相比，超微量分光光度計要求的樣品體積小，不需要比色皿，比色杯清洗方便，只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測平臺上擦拭干凈即可。除此之外，實驗過程也更為簡單，不需預熱，可隨時檢測，檢測結(jié)果顯示吸光度值的同時，程序直接給出濃度值。超微量分光光度計與傳統(tǒng)相比，體積更小，更方便使用。
實驗室如何選擇一款性價比高、質(zhì)量可靠的超微量分光光度計，下面幾項指標可以作為參考：
1、使用要求和預算：固定波長的價值量較低幾萬塊錢，可以做全波長掃描的價值量高，一般在6萬以上。如果僅要求可以測核酸、蛋白，可以選擇固定波長的。
2、檢測濃度范圍：根據(jù)日常提取樣品的濃度，范圍大的會檢測到15000ng/ul，范圍小的會在3000ng/ul。
3、光源：LED光源或者氙燈光源，
4、品牌：進口或者國產(chǎn)。國產(chǎn)品牌的價位一般在3-5萬，進口品牌的價位一般在4-10萬。對產(chǎn)品品牌要求高的，預算比較充足的用戶，可以考慮購買進口品牌的；國產(chǎn)品牌的性價比高，技術(shù)水平也能達到國外的先進水平。
紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。
由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同；
因此，每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。
分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息?？梢杂脴藴使鈭D譜再結(jié)合其它手段進行定性分析。
根據(jù)Lambert-Beer定律說明光的吸收與吸收層厚度成正比，比耳定律說明光的吸收與溶液濃度成正比;如果同時考慮吸收層厚度和溶液濃度對光吸收率的影響，即得朗伯-比耳定律。
即A=εbc，(A為吸光度，ε為摩爾吸光系數(shù)，b為液池厚度，c為溶液濃度)就可以對溶液進行定量分析。
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。
若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應完全一致。如果沒有標樣，也可以和現(xiàn)成的標準譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準確，精密度高，且測定條件要相同。
實驗證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度，以確定選擇哪一種溶劑。
應用：
在水和廢水監(jiān)測中的應用，對于一個水系的監(jiān)測分析和綜合評價，一般包括水相(溶液本身)、固相(懸浮物、底質(zhì))、生物相(水生生物)。
在水質(zhì)的常規(guī)監(jiān)測中，紫外可見分光光度法占有較大的比重。由于水和廢水的成分復雜多變，待測物的濃度和干擾物的濃度差別很大，在具體分析時必須選擇好分析方法。
在農(nóng)產(chǎn)品和食品分析中可用于檢測的組分或成分有蛋白質(zhì)、賴氨酸、葡萄糖、維生素C、硝酸鹽、亞硝酸鹽、砷、汞等；
在植物生化分析中可用于檢測葉綠素、全氮和酶的活力等；
在飼料分析中可用于檢測煙酸、棉酚、磷化氫和甲酯等。
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