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紫外分光光度計的應(yīng)用及工作原理

時間:2020-04-25    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

紫外分光光度計的應(yīng)用

  1、檢定物質(zhì)
  根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是最大吸收波長λmax和、摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。
  2、與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照
  將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定、紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì),則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標(biāo)樣,也可以和現(xiàn)成的標(biāo)、準(zhǔn)譜圖對照進(jìn)行比較。這種方法要求紫外分光光度計準(zhǔn)確,精密度高,且測定條件要相同。
  3、比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性
  4、純度檢驗
  5、推測化合物的分子結(jié)構(gòu)
  6、氫鍵強(qiáng)度的測定
  實(shí)驗證明,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不、同溶劑中氫鍵強(qiáng)度,以確定選擇哪一種溶劑、。
  7、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定
  8、反應(yīng)動力學(xué)研究
  9、在有機(jī)分析中的應(yīng)用
  有機(jī)分析是一門研究有機(jī)化合物的分離、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測定的科學(xué),它是在有機(jī)化學(xué)和分析化學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的綜合性學(xué)科。

標(biāo)簽: 紫外分光光度計
紫外分光光度計 紫外分光光度計的應(yīng)用_紫外分光光度計

紫外分光光度計的工作原理

    紫外可見光譜儀涉及的波長范圍在有機(jī)化學(xué)研究中得到廣泛的應(yīng)用。通常用作物質(zhì)鑒定、純度檢查,有機(jī)分子結(jié)構(gòu)的研究。


    在定量方面,可測定結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的化合物和混合物中各組分的含量,也可以測定物質(zhì)的離解常數(shù),絡(luò)合物的穩(wěn)定常數(shù),物質(zhì)分子量鑒別和微量滴定中指示終點(diǎn)以及在高效液相色譜中作檢測器等。

 


    基本工作原理:


    紫外分光光度計基本工作原理和紅外光譜儀相似,利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機(jī)物質(zhì),引起分子中價電子的躍遷,它將有選擇地被吸收。


    一組吸收隨波長而變化的光譜,反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內(nèi),對于一個特定的波長,吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度,因此測量光譜可以進(jìn)行定性分析,而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較,還能進(jìn)行定量分析。


    分光光度計的使用方法:


    (1)接通電源;(2)使用前預(yù)熱15min;(3)選擇波長;(4)選擇檢測器;(5)如果可能的話,選擇正確的縫寬;


    (6)插入適當(dāng)?shù)目瞻讓φ?(7)調(diào)解到0%的透過率;(8)將吸光值調(diào)到零;(9)分析樣品;(10)每測量10個樣品后,用空白對照校驗零刻度;(11)檢測儀器的可重復(fù)性。

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紫外分光光度計 紫外分光光度計的工作原理_紫外分光光度計

紫外分光光度計信號部分的故障處理

    紫外分光光度計應(yīng)用范圍包括市政和工業(yè)廢水,飲用水,加工過程用水,地表水,冷卻水和鍋爐補(bǔ)給水等。


    是實(shí)驗室普及率最高的一種光譜儀器了,由于靈敏度高、選擇性好、準(zhǔn)確度高、適用濃度范圍廣,重要是分析成本低、操作簡便、快速得到廣泛的應(yīng)用,長期在分析領(lǐng)域扮演很重要的角色。但是常常會聽某些同學(xué)為啥時候更換光源而煩惱,每次數(shù)據(jù)有差別,都覺得是光源惹得禍。

 

1.jpg


    紫外分光光度計信號部分:


    (1)紫外分光光度計樣品信號重現(xiàn)性不良;


    原因:排除儀器本身的原因外,最大的可能是樣品溶液不均勻所致;在簡易的單光束儀器中,樣品池架一般為推拉式的,有時重復(fù)推拉不在同一個位置上;


    檢查:更換一種穩(wěn)定的試樣判定;


    解決辦法:采取正確的試樣配置手段;修理推拉式樣品架的定位碰珠;


    (2)紫外分光光度計做基線掃描或樣品掃描時,基線或信號有一個大的負(fù)脈沖;


    原因:掃描速度設(shè)置得過快,信號在讀取時,誤將濾光片或光源鏡的切換當(dāng)做信號讀取了;


    檢查:改變掃描速度;


    (3)紫外分光光度計做基線掃描或樣品掃描時,基線或信號有一個長時間段的負(fù)值或滿屏大噪聲;


    原因:濾光片飼服電機(jī)“失步”,造成檔位錯位,國產(chǎn)電機(jī)尤甚;


    檢查:重新開機(jī)有可能回復(fù),或打開單色器對照波長與濾光片的相對位置來檢查(注意:打開單色器時要保護(hù)檢測器不被強(qiáng)光刺激);


    解決辦法:更換飼服電機(jī);


    (4)紫外分光光度計樣品出峰位置不對;


    原因:波長傳動機(jī)構(gòu)產(chǎn)生位移;


    檢查:通過氘燈的656.1nm的特征譜線來判斷波長是否準(zhǔn)確;


    解決辦法:對于高檔儀器而言處理手段相對簡單,使用儀器固有的自動校正功能即可;而對于相對簡單的儀器,這種調(diào)整則需要專業(yè)人員來進(jìn)行了;


    (5)紫外分光光度計信號的分辨率不夠,具體表現(xiàn)是:本應(yīng)疊加在某一大峰上的小峰無法觀察到;


    原因:狹縫設(shè)置過窄而掃描速度過快,造成檢測器響應(yīng)速度跟不上,從而失去應(yīng)測到的信號;按常理,一定的狹縫寬度要對應(yīng)一定范圍的掃描速度;或者狹縫設(shè)置得過寬,使儀器的分辨率下降,將小峰融合在大峰里了。


    檢查:放慢掃描速度看一看或?qū)ⅹM縫設(shè)窄;


    解決辦法:將掃描速度、狹縫寬窄、時間常數(shù)三者擬合成一個優(yōu)化的條件;


    (6)當(dāng)紫外分光光度計波長固定在某個波長下時,吸光值信號上下擺動,特別是測量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開關(guān)式的簡易儀器;


    原因:開關(guān)觸點(diǎn)因長期氧化所致造成接觸不良;


    檢查:用手加重力量按琴鍵時,吸光值隨之變化;


    解決辦法:用金屬活化劑清洗按鍵觸點(diǎn)即可;

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紫外分光光度計 紫外分光光度計信號部分的故障處理_紫外分光光度計

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