細胞破碎儀通過水介質(zhì)的空化作用，使細胞等結(jié)構(gòu)并不是十分緊密的物料發(fā)生破碎、分離。效果好，效率高。
超聲波細胞破碎儀是一種利用超聲波在液體中產(chǎn)生空化效應(yīng)的多功能、多用途儀器。它能用于多種動植物病毒、細胞細菌及組織的破碎，超聲波細胞破碎儀同時可用來乳化分立、勻化提取、消泡清晰、納米材料的制備、分散及加速化學反應(yīng)等。先歐超聲波細胞破碎儀被廣泛應(yīng)用于生物學、微生物學、物理學、動物學、農(nóng)學、制藥化工、污水處理、納米材料等領(lǐng)域。
細胞破碎儀應(yīng)用：
1.細胞破碎/裂解
2.抽提蛋白、核酸
3.修剪DNA/RNA
4.納米技術(shù)研究
5.染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)
6.樣品均質(zhì)、乳化
7.其它樣品處理
細胞破碎儀注意事項：
1.接口處一定要擦干，如果有水，將可能使研磨后旋開困難
2.適配器固定時一定要放在正確位置并旋緊，放下安全鎖，一面出現(xiàn)安全事故;研磨聲音異常，應(yīng)立即停止，檢查是否出現(xiàn)松動
3.放入樣品宜少不宜多，以免研磨不充分
4.適配器旋開困難時，可敲擊底部數(shù)下，或者耐心等待
5.防止凍傷
6.用后清潔整理
細菌工程菌胞內(nèi)表達主要分為兩種形式，一種是在強啟動子條件下的高效表達，由于蛋白的過度表達;
使蛋白不能及時有效折疊而發(fā)生無規(guī)則卷曲，以固體顆粒的形式堆積于胞間質(zhì)中，這就是所說的包涵體;
另外一種是間質(zhì)內(nèi)的可溶性表達，即可以發(fā)生正常折疊，具有生物活性。
一般情況下，細菌只要被正常破壁就可以通過離心的形式將包涵體和可溶性表達的蛋白分離開。
超聲破碎的條件一般是300w，10s/10s，20分鐘，具體條件可根據(jù)自身情況而定。
超聲前菌體的準備：菌液離心后，先用PBS將菌沉淀洗2-3遍;
然后按原菌液體積的1/5-1/10加入裂解液重懸菌體，裂解液的成分：
50mMTris-HCl,pH8.0,2mMEDTA，100mMNaCl，加溶菌酶至100ug/ml，0.1%TritonX-100。切記冰浴超聲！
如何判斷是否超聲完全，根據(jù)經(jīng)驗，一般有以下幾個方面：
1，外觀判斷：超聲前菌懸液是渾濁的，超聲完全后變的透明、清澈。
2，液體的粘性：超聲后菌液從槍頭滴下不粘連。
3，高速離心：有用高速離心檢測超聲破碎程度的（一般用6,000g10min,比一般離心收集菌體的轉(zhuǎn)速高一點）。沉淀是未破碎或破碎不完全的菌體。
4，染色：破碎后的菌液涂片，革蘭氏結(jié)晶紫溶液染色0.5分鐘，鏡檢。
（超聲后加入核酸酶消除核酸對蛋白的污染）
一些需要注意的問題：
1，蛋白以包涵體形式表達，追求的是高破碎率，要求細胞碎片很小;
而另一種蛋白是可溶形式表達，所以細胞碎片不能很小，兩種情況要求不同但目的相同，都是便于后期的固液分離。
2，如果超聲時出現(xiàn)黑色沉淀，說明超聲功率太強。
3，超聲時間太長、功率太高對蛋白活性肯定有影響。
4，盡量防止泡沫的產(chǎn)生。
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