液相色譜儀是常用的實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備，在使用中經(jīng)常會(huì)遇到這樣或那樣的問題，給實(shí)驗(yàn)人員帶來了一定的困擾，對(duì)此，儀多多整理了5個(gè)常見的問題及答案，可供參考！
一、問：
做的黃酮苷，用甲醇+乙腈+四氫呋喃+醋酸(1:1:19.4:78.6)溶液做流動(dòng)相，現(xiàn)在分離效果不理想，想延長保留時(shí)間看看怎么樣，也就是增大流動(dòng)相的極性!PS：用的C18柱。
答：
用液相色譜，C18柱分離黃酮苷，不是太清楚為什么要選用甲醇+乙腈+四氫呋喃+醋酸這樣一種很復(fù)雜的流動(dòng)相體系，難道體積分?jǐn)?shù)78.6%的醋酸是直接用的冰醋酸?這是一種很不可思議的流動(dòng)相配比。建議直接使用甲醇-水，或是乙腈-水作為流動(dòng)相，水相中可以適當(dāng)加點(diǎn)甲酸或是乙酸來得到較佳分離效果。
二、問：
苯甲酸的測定中流動(dòng)相走了很久，進(jìn)樣以后，保留時(shí)間還是變，難道這個(gè)項(xiàng)目的柱子這么難平衡么?
答：
保留時(shí)間一直在變，說明系統(tǒng)沒有平衡好，可以從多個(gè)方面去排查原因。
1、流動(dòng)相可能是最主要的原因，流動(dòng)相平衡時(shí)間是否充足，管路有沒有氣泡，流動(dòng)相中有機(jī)相是否蒸發(fā)，比例閥工作是否正常?
2、泵有可能存在問題，輸液是否正常，壓力是否穩(wěn)定，泵密封墊是否完好，是否有漏點(diǎn)?
3、色譜柱也需要排查，是否恒溫，是否有漏液?
三、問：
液相色譜中影響峰擴(kuò)散的有那些因素?與氣相色譜相比，有哪些不同之處?
答：
氣相色譜與液相色譜在速率理論方程上的差異主要是由于氣體與液體的性質(zhì)差異造成的。液體的黏度比氣體大約100倍，表面張力大約10000倍，密度大約1000倍；氣體還具有高壓縮性系數(shù)。溶質(zhì)在液體中的擴(kuò)散系數(shù)要遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于在氣體中，液相在傳質(zhì)過程中對(duì)理論塔板高度的影響尤其的大。與氣相色譜速率理論方程不同的是，液相色譜增加了固定相孔結(jié)構(gòu)內(nèi)滯留流動(dòng)相傳質(zhì)項(xiàng)。
四、問：
pH值不同出峰時(shí)間不同，具體原理是什么?除了pH值會(huì)影響，還有其他因素嗎?
答：
流動(dòng)相的pH值主要是影響到分配系數(shù)而出峰時(shí)間的不同。
影響出峰時(shí)間的因素有很多，從分配系數(shù)、容量因子等各個(gè)方面考慮，與目標(biāo)化合物在固定相和流動(dòng)相中的分配性質(zhì)有關(guān)，還與流速，壓力，柱溫等液相色譜儀參數(shù)有關(guān)，具體涉及下面幾種因素的影響：
1、目標(biāo)化合物本身，具體包括分子量、結(jié)構(gòu)、化合物類型、極性等；
2、流動(dòng)相，具體包括流動(dòng)相構(gòu)成、配比、流動(dòng)相各組分極性，洗脫方式，流速等；
3、固定相，具體包括固定相種類，結(jié)構(gòu)，色譜柱長度等；
4、分配系數(shù)與容量因子，具體包括化合物在流動(dòng)相與固定相之間的分配情況，柱溫等。
五、問：
現(xiàn)在用液相色譜做含量測定時(shí)，保留時(shí)間太長，20分鐘左右才出峰，有沒什么方法提前，原理是什么?
答：
可以從通過改變目標(biāo)組分容量因子k的方式，以及縮短柱長增加柱溫等方式，具體可以采取以下方法：
1、調(diào)整流動(dòng)相，具體包括流動(dòng)相構(gòu)成、配比、流動(dòng)相各組分極性，洗脫方式，提高流速等；
2、調(diào)整固定相，具體包括固定相種類，結(jié)構(gòu)，縮短色譜柱長度等；
3、增加柱溫，降低流動(dòng)相傳質(zhì)阻力等。
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