1 適用范圍

       本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定水中萘酚的高效液相色譜法。

       本標(biāo)準(zhǔn)適用于地表水、地下水、生活污水、工業(yè)廢水和海水中 1-萘酚（α-萘酚）和 2-萘酚（β-萘酚）的測(cè)定。

       當(dāng)取樣體積為 10.0  ml，洗脫液體積為 10.0  ml，進(jìn)樣體積為 10.0  μl 時(shí)，在發(fā)射波長 425  nm處，本標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定 1-萘酚和 2-萘酚的方法檢出限均為 2 μg/L，測(cè)定下限均為 8 μg/L；在發(fā)射波長 360  nm 處，本標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定 2-萘酚的方法檢出限為 0.2 μg/L，測(cè)定下限為 0.8 μg/L。

       當(dāng)取樣體積為 50.0  ml，洗脫液體積為 10.0  ml，進(jìn)樣體積為 10.0  μl 時(shí)，在發(fā)射波長 425  nm處，本標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定 1-萘酚和 2-萘酚的方法檢出限均為 0.3 μg/L，測(cè)定下限均為 1.2 μg/L；在發(fā)射波長 360  nm 處，本標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定 2-萘酚的方法檢出限為 0.06 μg/L，測(cè)定下限為 0.24 μg/L。

2 規(guī)范性引用文件

       本標(biāo)準(zhǔn)引用了下列文件或其中的條款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

      GB  17378.3 海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范  第 3 部分：樣品采集、貯存與運(yùn)輸

      HJ  91.1 污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范

       HJ/T 91 地表水和污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范

       HJ/T 164 地下水環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范

3 方法原理

       取一定量酸化后的樣品（pH 值為 1～2），用 C18 固相萃取柱萃取，甲醇洗脫，洗脫液中的萘酚經(jīng)液相色譜分離后，用熒光檢測(cè)器檢測(cè)。根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。

4 干擾和消除

4.1 水中萘胺、苯胺類等堿性有機(jī)化合物，在酸性條件下（pH 值為 1～2）不會(huì)被 C₁₈ 固相萃取柱吸附，不干擾萘酚的測(cè)定。

4.2 常見的酚類化合物（包括苯酚、2,4-二硝基酚、2,6-二甲基酚、2-甲基酚、3-甲基酚、4-甲基酚、4-氯酚、2,4-二氯酚、2,4,6-三硝基酚、1,3-苯二酚、對(duì)硝基酚、鄰氯酚、鄰硝基酚、2,4-二甲酚、4-氯間甲酚、4,6-二硝基鄰甲酚、2,4,6-三氯酚和五氯酚等），在本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的熒光檢測(cè)波長下，不干擾萘酚的測(cè)定。

4.3 與萘酚保留時(shí)間相近的其他酸性或中性有機(jī)化合物可能會(huì)干擾萘酚的測(cè)定，可通過改變流動(dòng)相的比例改善分離度，也可選擇在相對(duì)無干擾的檢測(cè)波長下測(cè)定，避免干擾。

5 試劑和材料

       除非另有說明，分析時(shí)均使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的分析純?cè)噭瑢?shí)驗(yàn)用水為不含目標(biāo)化合物物的二次蒸餾水或純水設(shè)備制備的水。

5.1 乙腈（CH₃CN）：液相色譜純。

5.2 甲醇（CH₃OH）：液相色譜純。

5.3 氫氧化鈉（NaOH）。

5.4 抗壞血酸（C₆H₈O₆）。

5.5  1-萘酚：w（C₁₀H₇OH）≥99.5%。

5.6  2-萘酚：w（C₁₀H₇OH）≥99.5%。

5.7 鹽酸：ρ（HCl）=1.18  g/ml。

5.8 鹽酸溶液：1+1。

5.9 鹽酸溶液：c（HCl）=0.01  mol/L。

       量取 1.8  ml 鹽酸溶液（5.7），用水稀釋至 1000  ml。

5.10 氫氧化鈉溶液：c（NaOH）=5  mol/L。

       稱取 20  g 氫氧化鈉（5.3），加 100  ml 水溶解。

5.11 甲醇溶液：w（CH3OH）=0.2%。

       取 2.0  ml 甲醇（5.2），用水稀釋至 1000ml。

5.12 萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ≈1000  mg/L。

       分別稱取 0.10  g（準(zhǔn)確至 0.0001  g）1-萘酚（5.5）和 2-萘酚（5.6）于 100  ml 燒杯中，  加入 100  mg 抗壞血酸（5.4），用少量甲醇（5.2）溶解，轉(zhuǎn)移至 100  ml 容量瓶中，用甲醇（5.2）稀釋定容至標(biāo)線，混勻。分裝于棕色樣品瓶（6.4）中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存 3 個(gè)月。也可購買市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，按標(biāo)準(zhǔn)溶液證書要求保存。

5.13 萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ：ρ=100  mg/L。

       量取適量萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)貯備液（5.12）于 10  ml 容量瓶中，用甲醇（5.2）稀釋定容至標(biāo)線，混勻。分裝于棕色樣品瓶（6.4）中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存 3 個(gè)月。

5.14 萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅱ：ρ=10.0  mg/L。

       量取 1.00  ml 萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ（5.13）于 10  ml 容量瓶中，用甲醇（5.2）定容，  混勻。于棕色樣品瓶（6.4）中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存 3 個(gè)月。

5.15 C₁₈ 固相萃取柱：填料為十八烷基鍵合硅膠，500 mg/6  ml。

5.16 微孔濾膜：孔徑≤0.45 μm，聚四氟乙烯材質(zhì)。

6 儀器和設(shè)備

       除非另有說明，分析時(shí)均使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的 A 級(jí)玻璃量器。

6.1 高效液相色譜儀：具熒光檢測(cè)器。

6.2 色譜柱：250  mm（長）×4.6  mm（內(nèi)徑）×5  μm（粒徑），填料為十八烷基鍵合硅膠（C₁₈），也可使用其他等效液相色譜柱。

6.3 采樣瓶：250  ml 或 500  ml 帶聚四氟乙烯襯墊的螺旋蓋棕色玻璃瓶或磨口瓶。

6.4 樣品瓶：2  ml、10  ml 或 50  ml 帶聚四氟乙烯襯墊的螺旋蓋棕色玻璃瓶。

6.5 固相萃取裝置。

6.6 一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備。

7 樣品

7.1 樣品的采集和保存

       采樣點(diǎn)位的布設(shè)和樣品的采集執(zhí)行 HJ/T  91、HJ  91.1 或 HJ/T  164、GB  17378.3 中的相關(guān)規(guī)定。將樣品采集到采樣瓶（6.3）中，于每升樣品中加入 0.5  g 抗壞血酸（5.4），待完全溶解后，用鹽酸溶液（5.8）或氫氧化鈉溶液（5.10）調(diào)節(jié)樣品的 pH 至 1～2，密封。于 4℃以下避光冷藏運(yùn)輸和保存，14  d 內(nèi)完成分析。

7.2 試樣的制備

       將 C18 固相萃取柱（5.15）固定在固相萃取裝置（6.5）上，依次用 9  ml 甲醇（5.2）和 9  ml 鹽酸溶液（5.9）活化，始終保持柱頭浸潤。將樣品（7.1）平衡至室溫，搖勻。根據(jù)樣品中目標(biāo)化合物含量，量取 10.0  ml～50.0  ml 樣品于樣品瓶（6.4）中，然后使樣品以 3～4  ml/min 流速通過萃取柱。在柱填料剛好暴露于空氣之前，用 5  ml 水，分 2 次沖洗樣品瓶。洗滌液一并轉(zhuǎn)移至柱上，棄去流出液。加壓擠出或抽干萃取柱中的水后，用 10.0  ml 甲醇（5.2）洗脫，接收洗脫液于 10  ml 樣品瓶（6.4）中，待初始洗脫液流出后，關(guān)閉活塞，浸泡固相萃取柱至少 5  min。打開活塞，收集全部洗脫液，用甲醇（5.2）定容至 10.0  ml，混勻，用微孔濾膜（5.16）過濾，待測(cè)。

       注 1：對(duì)于基體復(fù)雜、有機(jī)物含量未知的樣品，為避免穿透，可以分別用兩根固相萃取柱萃取不同體積的同一個(gè)樣品。例如，分別萃取 10.0  ml 和 20.0  ml 樣品，當(dāng)后者的測(cè)定結(jié)果（試樣濃度）比前者低 20%時(shí)，即說明后者的吸附容量已達(dá)到飽和，需適當(dāng)減少取樣量或?qū)悠废♂尯笤俟滔噍腿　?/span>

       注 2：對(duì)于清潔樣品（不包括高鹽水和海水），也可將樣品（7.1）用微孔濾膜（5.16）過濾后，直接進(jìn)樣。其方法檢出限可參考取樣體積和洗脫液體積均為 10.0  ml 的相關(guān)數(shù)據(jù)。

7.3 空白試樣的制備

       用實(shí)驗(yàn)用水代替樣品，按照與試樣的制備（7.2）相同的步驟進(jìn)行空白試樣的制備。

8 分析步驟

8.1 儀器參考條件

       流動(dòng)相 A：乙腈（5.1），流動(dòng)相 B：甲醇溶液（5.11）。

       洗脫程序：流動(dòng)相 A/流動(dòng)相 B=47/53（V/V）；

       流速：1.2  ml/min；

       進(jìn)樣體積：10.0 μl；

       柱溫：35℃；

       檢測(cè)器：熒光檢測(cè)器；

       激發(fā)波長：228  nm；

       發(fā)射波長：同時(shí)測(cè)定 1-萘酚和 2-萘酚時(shí)，選擇 425  nm 作為定量檢測(cè)波長，435  nm 作為輔助定性波長；只測(cè)定 2-萘酚或在 425  nm 處測(cè)定 2-萘酚有干擾時(shí)，選擇 360  nm 作為定量檢測(cè)波長，350  nm 作為輔助定性波長。

       對(duì)于基體復(fù)雜的樣品，應(yīng)采用梯度洗脫。梯度洗脫參考程序見表 1。

表 1  梯度洗脫參考程序

8.2 校準(zhǔn)

8.2.1 標(biāo)準(zhǔn)系列的配制

       分別取適量萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅱ（5.14）或萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ（5.13）于 10  ml棕色容量瓶中，用甲醇（5.2）定容，配制至少包含 5 個(gè)濃度點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)系列。標(biāo)準(zhǔn)系列溶液配制及其參考濃度見表 2。

表 2  標(biāo)準(zhǔn)系列溶液配制及其參考濃度

水質(zhì) 萘酚的測(cè)定 高效液相色譜法 HJ 1073-2019.pdf

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