在高效液相色譜實(shí)驗(yàn)中手動(dòng)進(jìn)樣閥在每次使用后,尤其是進(jìn)濃度差異比較大的樣品時(shí)要用專用工具(不是帶針頭的注射器)沖洗進(jìn)樣閥,沖洗時(shí)必須沖洗進(jìn)樣閥兩頭數(shù)次,每次數(shù)毫升。以防止無(wú)機(jī)鹽沉積和樣品微粒造成閥內(nèi)部磨損或阻塞以及樣品的交叉污染。
安裝時(shí)進(jìn)樣閥的5,6出口要與注射器在同一水平線上,以防止虹吸現(xiàn)象的發(fā)生,導(dǎo)致進(jìn)樣量的重復(fù)性變異。
進(jìn)樣量的多少要根據(jù)定量管的環(huán)體積決定:
當(dāng)樣品量較少時(shí):進(jìn)樣體積由注射器的進(jìn)樣體積決定,但最大體積要小于環(huán)體積的1/2。
當(dāng)樣品量較多時(shí):進(jìn)樣體積由定量管的體積決定,為保證樣品完全把定量管的流動(dòng)相置換干凈,需注射5-6倍的環(huán)體積。
要使用專用的液相注射器進(jìn)樣,絕對(duì)不可用氣相注射器。注射器前應(yīng)用專用的樣品過(guò)濾器。
高效液相色譜儀可以完成二元高壓梯度洗脫,也可以拓展為制備系統(tǒng),采用高壓混合器連接兩個(gè)高壓恒流泵,利用RS232通訊,即可實(shí)現(xiàn)梯度分析;
便于用戶自由選擇與搭配,混合器材主要由不銹鋼、生物惰性PEEK等構(gòu)成,用途廣泛;
可廣泛應(yīng)用于研究開(kāi)發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測(cè)、化工分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)等眾多分析領(lǐng)域。
高效液相色譜儀分離原理:液-液分配(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化學(xué)鍵合相色譜(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流動(dòng)相和固定相都是液體。
流動(dòng)相與固定相之間應(yīng)互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個(gè)明顯的分界面。
當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱,溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配。達(dá)到平衡時(shí),高效液相色譜儀報(bào)價(jià),服從于高效液相色譜計(jì)算公式;
6種定量計(jì)算方法:歸一法、修正歸一法、帶比例因子的修正歸一法、內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法,高效液相色譜儀適用范圍,以及指數(shù)計(jì)算法。
高效液相色譜儀特點(diǎn):
1、梯度洗脫內(nèi)部軟件可自控制,編輯、存貯60個(gè)梯度方法,運(yùn)行復(fù)雜的梯度程序;
2、泵形式:串聯(lián)雙柱塞 浮動(dòng)式密封圈;泵頭自沖洗功能,泵無(wú)須手動(dòng)排空即可輸液“自吸式單向閥”技術(shù),可延長(zhǎng)密封圈使用壽命;
3、光路系統(tǒng)采用精密定位結(jié)構(gòu)和獨(dú)特的散熱技術(shù),高效的光學(xué)系統(tǒng)和數(shù)字過(guò)濾;
4、程序化的溶劑類(lèi)和壓縮因子,可自動(dòng)補(bǔ)償;完整的預(yù)清洗功能,更于快速溶劑更換;
5、波長(zhǎng)調(diào)節(jié)功能:既可由鍵盤(pán)面板控制也可由程序軟件設(shè)定,全封閉集成型光電檢測(cè)元件,無(wú)需任何機(jī)械部分調(diào)整即可選擇或改變波長(zhǎng);
6、光源運(yùn)行時(shí)間在線監(jiān)測(cè)并顯示,方便用戶確定光源壽命;
7、三條流量校正曲線以及特有的多點(diǎn)參數(shù)校正,保障了極高的流量準(zhǔn)確性;
8、梯度:高壓2-3元;梯度方式:高壓,梯度洗脫內(nèi)部軟件可自控制,可通過(guò)PC機(jī)及泵控制;
9、實(shí)時(shí)顯示樣品池和參比池能量,方便判斷光源和流通池狀態(tài);
10、紫外檢測(cè)器具有自動(dòng)波長(zhǎng)定位調(diào)整,自動(dòng)調(diào)零,多量程輸出選擇;
11、智能化高,可實(shí)現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)化平臺(tái)監(jiān)控,提高了你的QC效益;
12、自動(dòng)化,讓你從繁鎖的分析操作中解放出更多的時(shí)間。
1、流動(dòng)相的抽濾要求
色譜純?cè)噭握麴s水,緩沖鹽一定要過(guò)濾。
2、吸濾頭
特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流動(dòng)相通過(guò)吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗;清洗不成功則需要更換。
3、單向閥
如遇到泵壓不穩(wěn)或流動(dòng)相不能抽取,則可能是單向閥出現(xiàn)問(wèn)題,卸下用異丙醇超聲波清洗,清洗時(shí)須按其安裝的反相放置在小燒杯中,切記不可與安裝方向倒置超洗!
4、泵頭
泵頭漏液或出現(xiàn)其它故障一般要申請(qǐng)維修(如漏液,或更換柱塞桿及其密封墊等)。
5、過(guò)濾片
當(dāng)色譜峰出現(xiàn)異常情況時(shí),有可能是此部件被污染,拆下用異丙醇超洗或更換過(guò)濾墊片。
6、排液閥
此處不能完全密封或漏液時(shí)一般是其中的墊片污染或磨損,可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。
7、手動(dòng)進(jìn)樣器
平時(shí)應(yīng)注意用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進(jìn)樣分析狀態(tài)清洗;如出現(xiàn)漏液現(xiàn)象,原因極可能為轉(zhuǎn)子密封墊磨損或污染,一般須申請(qǐng)維修或更換配件。
8、流通池
在色譜峰不正常時(shí)可能是此部件被污染可拆卸后取出其中的墊片用異丙醇超洗(可根據(jù)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作或申請(qǐng)維修)。
9、工作站
出現(xiàn)死機(jī)可重啟計(jì)算機(jī);不正常運(yùn)行時(shí),首先可更換電腦測(cè)試其硬件故障;或在本機(jī)上重新插撥接口、重新安裝軟件。