分光光度計(jì)計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源，通過(guò)系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源，光源透過(guò)測(cè)試的樣品后，部分光源被吸收，計(jì)算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比?；谖镔|(zhì)對(duì)光(對(duì)光的波長(zhǎng))的吸收具有選擇性，不同的物質(zhì)都有各自的吸收光帶，所以，當(dāng)光色散后的光譜通過(guò)某一溶液時(shí)，其中某些波長(zhǎng)的光線就會(huì)被溶液吸收。在一定的波長(zhǎng)下，溶液中物質(zhì)的濃度與光能量減弱的程度有一定的比例關(guān)系，即符合比爾定律。其詳細(xì)使用方法步驟具體如下。

　　1、預(yù)熱儀器

　　為使測(cè)定穩(wěn)定，將電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)，使儀器預(yù)熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時(shí)和在不測(cè)定時(shí)應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開(kāi)，使光路切斷。

　　2、選定波長(zhǎng)

　　根據(jù)要求，轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)器，使指針指示所需要的單色光波長(zhǎng)。

　　3、固定靈敏度檔

　　根據(jù)有色溶液對(duì)光的吸收情況，為使吸光度讀數(shù)為0.2-0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動(dòng)靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不再變動(dòng)。一般測(cè)量固定在“1”檔。

　　4、調(diào)節(jié)“0”點(diǎn)

　　輕輕旋動(dòng)調(diào)“0”電位器，使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時(shí)，比色皿暗箱蓋是打開(kāi)的，光路被切斷，光電管不受光照、。

　　5、調(diào)節(jié)T=100%

　　將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?、的比色皿放入比色皿座架中的第一格?nèi)，有色溶液放在其它格內(nèi)，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉(zhuǎn)動(dòng)光量調(diào)節(jié)器，使透光度T=100%，即表頭指針恰好指在T=100%處。

　　6、測(cè)定

　　輕輕拉動(dòng)比色皿座架拉桿，使有色溶液進(jìn)入光路，此時(shí)表頭指針?biāo)緸樵撚猩芤旱奈舛華。讀數(shù)后，打開(kāi)比色皿暗箱蓋。

　　7、關(guān)機(jī)

　　實(shí)驗(yàn)完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。

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