色譜柱的性能
與液相色譜柱的性能相關(guān)的因素很多，基質(zhì)（matrix）或者說擔(dān)體、載體的化學(xué)性質(zhì)、鍵合相（固定液）的化學(xué)性質(zhì)、填料形狀大小粒度分布、碳量和鍵合度等等。
色譜柱填料可以由基質(zhì)直接構(gòu)成，如硅膠、氧化鋁、高交聯(lián)度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等；也可以在這些基質(zhì)的基礎(chǔ)上涂布或化學(xué)鍵合固定液來構(gòu)成，如：較為經(jīng)典的各種ODS柱、氨基柱、氰基柱等。
一、基質(zhì)的特點：
1、 硅膠
硅膠是陶瓷性質(zhì)的無機物基質(zhì)，剛性大，不易變形。化學(xué)性質(zhì)較穩(wěn)定，但對于水溶液尤其堿性水溶液仍然是不穩(wěn)定的，即使表面經(jīng)過良好的化學(xué)鍵合，覆蓋了固定液，還是要注意水、堿性溶液、酸性溶液對硅膠的溶解作用，基質(zhì)或者說是柱床（packed bed）溶解對色譜柱的影響是致命的。以硅膠為基質(zhì)的填料構(gòu)成了目前絕大多數(shù)的色譜柱填料。純硅膠填料適宜分離溶于有機溶劑的極性、弱極性的非強離解型的化合物，硅膠也可以做凝膠色譜但柱效較低。硅膠基質(zhì)鍵合固定相的高壓液相填料，有其他填料無法比擬的高分離效能。
2、 二氧化鋁
二氧化鋁和硅膠相似，但對水溶液、酸性堿性水溶液溶液更加不穩(wěn)定。所以，極少用作鍵合固定相的基質(zhì)，也是適宜分離溶于有機溶劑的極性、弱極性的非強離解型的化合物，尤其是分離芳香族碳氫化合物。酸性易離解的化合物容易在二氧化鋁上形成死吸附。另外，氧化鋁分離幾何異構(gòu)體能力優(yōu)于硅膠。
3、 聚合物填料
聚合物基質(zhì)受壓會變形，壓力限度低但pH使用范圍寬。苯乙烯-二乙烯苯基質(zhì)疏水性強，使用任何流動相，在整個pH范圍內(nèi)穩(wěn)定，可以用強酸、強堿來清洗色譜柱。甲基丙烯酸酯基質(zhì)比苯乙烯-二乙烯苯疏水性更強，但可以通過適當(dāng)?shù)墓δ芑揎椬兂捎H水性的。由于不耐壓、有溶脹性，所以聚合物填料適宜用于大分子像蛋白質(zhì)或合成的高聚物，另外還可以制成分子排阻、離子交換柱。近年發(fā)展迅速的大孔樹脂，實際上主體就是苯乙烯-二乙烯苯聚合物或類似的合成高聚物。
由于硅膠基質(zhì)的絕對地位，以下主要以硅膠為例。
二、形狀大小粒度分布
基質(zhì)要成為填料，首先要制成合適的形狀和大小。硅膠形狀有：薄殼型、無定形全多孔、球形全多孔，另外還有先做成微珠再堆積成球形全多孔的。通常只說不定形、球形。無定形全多孔的填料容易制備、價格低、粒度分布較均勻，但渦流擴散大，滲透性差，比較難填裝出穩(wěn)定的柱床，一般用來做制備柱。球形全多孔填料渦流擴散小，滲透性好；如果是硅膠先做成珠子再堆積而成的話，具有傳質(zhì)阻抗小、載樣量大的優(yōu)點，柱效也更高。球形填料外形對稱，比較容易填出穩(wěn)定的柱床。填料的大小一般不能直接測量，因為填料粒度有一定分布范圍，一般給出的大小只是用一定方法測得的表觀大小。填料大小與柱效、柱壓的關(guān)系為：柱效與填料大小成反比，柱壓與填料大小的二次方成正比。所以，快速分析柱使用3微米粒度的填料、一般做成5厘米長，就是為了降低柱壓；需要注意到降低粒度所得到的柱效增加跟不上柱壓的增加快。
色譜柱的安裝：
?。?）拆開柱包裝盒，確認(rèn)色譜柱的類型、 尺寸、出廠日期以及柱內(nèi)貯存的溶劑。
（2）擰下柱兩端接頭的密封堵頭放回包裝盒供備用。
?。?）按柱管上標(biāo)示的流動相流向，將色譜柱的入口端通過連接管與進樣閥出口相連接(如條件允許，建議在柱前使用保護柱)；柱的出口與檢測器連接。連接管是外徑為1.57mm、內(nèi)徑為0.1-0.3mm的不銹鋼管。連接管的兩端均有空心螺釘及密封用壓環(huán)。在接管時一定要設(shè)法降低柱外死體積。連接管通過空心螺釘、壓環(huán)后盡量用力插到底，然后順時針擰緊空心螺釘，直到擰不動為止，再用扳手繼續(xù)順時針擰1／4-1／2圈，切記不要用力過大。如色譜柱通過流動相加壓后有漏液現(xiàn)象，請用扳手繼續(xù)順時針擰1／4圈，直至不漏液為止。
色譜柱的儲存:
1．防止緩沖溶液和水溶液流動相產(chǎn)生微生物，做到流動相用多少配多少，或在水流動相中加200ppm的疊氮鈉以抑制細菌成長（一定當(dāng)心其毒性和潛在的爆炸性）；或在流動相中加20%的有機改性劑，也可抑制微生物生長，有機改性劑還有助于流動相脫氣。
2．盡可能將色譜柱貯存于100%有機溶劑（乙晴比較好）中，避免在緩沖溶液中保存。
3．使用緩沖溶液后的色譜柱，應(yīng)用15～20倍柱體積的不含緩沖劑的同種水—有機溶劑流動相沖洗色譜柱，后換成100%有機溶劑儲存。
4．避免用純凈水沖洗鍵合致密的C18柱。
5．將色譜柱的兩端用堵頭擰好，以免柱床填料干裂。
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