簡述液相色譜檢測器
紫外吸收檢測器 ultraviolet absorption detector
紫外吸收檢測器 ultraviolet absorption detector 簡稱紫外檢測器（UV），是基于溶質(zhì)分子吸收紫外光的原理設(shè)計(jì)的檢測器。因?yàn)榇蟛糠殖Ｒ娪袡C(jī)物質(zhì)和部分無機(jī)物質(zhì)都具有紫外吸收性質(zhì)，所以該檢測器是液相色譜中應(yīng)用廣泛的檢測器，幾乎所有液相色譜儀都配置了這種檢測器。它不僅有較好的選擇性和較高的靈敏度，而且對(duì)環(huán)境溫度、流動(dòng)相組成變化和流速波動(dòng)不太敏感，因此既可用于等度洗脫，也可用于梯度洗脫。其檢測靈敏度在mg/L至mg/L范圍。
可見光檢測器 visible light detector
可見光檢測器 visible light detector 又稱分光光度檢測器，是基于溶質(zhì)分子吸收可見光的原理設(shè)計(jì)的檢測器。能夠直接采用可見光檢測的溶質(zhì)不是很多，而且多數(shù)靈敏度也不高，但采用具有高摩爾吸光系數(shù)的有機(jī)試劑（配位體和螯合劑）作為衍生化試劑進(jìn)行柱前或柱后衍生操作的衍生化光度檢測法是相當(dāng)有用的，特別是在金屬離子配合物液相色譜中的應(yīng)用是相當(dāng)成功的。
蒸發(fā)光散射檢測器克服常見的HPLC檢測難題
雖然陣法光散射檢測器(Evaportive light Scattering,ELSD)已經(jīng)開發(fā)生產(chǎn)15年，但是對(duì)于許多色譜工作者來說，它仍是一個(gè)新產(chǎn)品。第一臺(tái)ELSD是由澳大利亞的Union Carbide研究實(shí)驗(yàn)室的科學(xué)家研制開發(fā)的，并在八十年代初轉(zhuǎn)化為商品，八十年代以激光為光源的第二代ELSD面世。此后，通過不斷設(shè)計(jì)提高了ELSD的操作性能?，F(xiàn)在ELSD越來越多的作為通用型檢測器]用于高效液相色譜，超臨界色譜（SFC）和逆流色譜中。ELSD最大的優(yōu)越性在于能檢測不含發(fā)色團(tuán)的化合物，如：碳水化合物、脂類、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性劑、藥物，并在沒有標(biāo)準(zhǔn)品和化合物結(jié)構(gòu)參數(shù)未知的情況下檢測未知化合物 。
ELSD的通用檢測方法消除了常見于傳統(tǒng)HPLC檢測方法中的難點(diǎn)，不同于紫外和熒光檢測器，ELSD的響應(yīng)不依賴與樣品的光學(xué)特性，任何揮發(fā)性低于流動(dòng)相的樣品均能被檢測，不受其官能團(tuán)的影響。ELSD的響應(yīng)值與樣品的質(zhì)量成正比，因而能用于測定樣品的純度或者檢測未知物。示差檢測器（RI）也可以說是一種通用型檢測器，打它靈敏度低，并與梯度脫洗不相容。質(zhì)譜是另一種通用型檢測器，但它的昂貴操作費(fèi)用和復(fù)雜性限制了它的應(yīng)用。
ELSD的獨(dú)特檢測方法，對(duì)于它的多種用途和高性能至為關(guān)鍵。ELSD檢測只要分為三個(gè)步驟：（1）用惰性氣體霧化脫洗液（2）流動(dòng)相在加熱管（漂移管）中蒸發(fā)（3）樣品顆粒散射光后得到檢測。
液相色譜具有分離效率高、分析速度快和應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn),特別適合于高沸 點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性和熱穩(wěn)定性差的化合物的分離分析。目前液相色譜已成為化學(xué)、生化、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)業(yè)、環(huán)保、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離技 術(shù),是分析化學(xué)家和生物化學(xué)家手中用于解決他們面臨的各種實(shí)際分析和分離課題必不可少的工具之一。雖然在檢測分析中使用了昂貴的、性能優(yōu)越的精密儀 器,但是由于在樣品的前處理,標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備,樣品液的測定,分析中的污染,儀器常見故障等等問題上的不注意,而引起大的系統(tǒng)誤差,使整個(gè)測定分析失敗。 現(xiàn)就液相色譜分析的應(yīng)用中樣品預(yù)處理注意的幾個(gè)環(huán)節(jié),作簡要分析,以達(dá)到更好的檢測效果。1、液相色譜柱的結(jié)構(gòu)：
a、空柱由柱接頭、柱管及濾片組裝而成。
柱接頭采用低死體積結(jié)構(gòu)，柱接頭是兩端螺紋組件，一端是為7/16英寸外螺紋，另一端是3/16英寸的內(nèi)螺紋(國內(nèi)外已規(guī)范化)。7/16英寸外螺紋與1/4英寸柱管(Φ6.35mm)連接，中間放置壓壞用于密封。3/16英寸的內(nèi)螺紋與1/16英寸(Φ1.57mm)的連接管連接，中間也放置壓環(huán)用于柱接頭的密封。為了盡量減少柱外死體積，在安裝色譜柱時(shí)，用Φ1.57mm連接管通過空心螺釘壓環(huán)后要盡量插到底，然后再擰緊空心螺釘。壓環(huán)被空心螺釘擠壓變形后緊箍在連接管上(連接管通過壓環(huán)后露出的管長度應(yīng)嚴(yán)格控制在2.5mm長或其他固定尺寸)。
在兩端柱接頭內(nèi)，柱管兩端各放置一片不銹鋼濾片(或?yàn)V網(wǎng))，用于封堵柱填料不被流動(dòng)相沖出柱外而流失。空柱各組件均為316#不銹鋼材質(zhì)，能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對(duì)其有一定的腐蝕性，故使用時(shí)要注意，柱及連接管內(nèi)不能長時(shí)間存留此類溶劑，以避免腐蝕。
b、柱填料：
液相色譜柱的分離作用是在填料與流動(dòng)相之間進(jìn)行的，柱子的分類是依據(jù)填料類型而定。
正相柱：多以硅膠為柱填料。根據(jù)外型可分為無定型和球型兩種，其顆粒直徑在3—10?m的范圍內(nèi)。另一類正相填料是硅膠表面鍵合—CN，-NH2等官能團(tuán)即所謂的鍵合相硅膠。
反相柱：主要是以硅膠為基質(zhì)，在其表面鍵合十八烷基官能團(tuán)(ODS)的非極性填料。也有無定型和球型之分。
常用的其他的反相填料還有鍵合C8、C4、C2、苯基等，其顆粒粒徑在3—10?m之間。
2、色譜柱的安裝：
a、拆開柱包裝盒，確認(rèn)色譜柱的類型、尺寸、出廠日期以及柱內(nèi)貯存的溶劑。
b、擰下柱兩端接頭的密封堵頭放回包裝盒供備用。
c、按柱管上標(biāo)示的流動(dòng)相流向，將色譜柱的入口端通過連接管與進(jìn)樣閥出口相連接(如條件允許，建議在柱前使用保護(hù)柱);柱的出口與檢測器連接。連接管是外徑為1.57mm、內(nèi)徑為0.1-0.3mm的不銹鋼管。連接管的兩端均有空心螺釘及密封用壓環(huán)。在接管時(shí)一定要設(shè)法降低柱外死體積。連接管通過空心螺釘、壓環(huán)后盡量用力插到底，然后順時(shí)針擰緊空心螺釘，直到擰不動(dòng)為止，再用扳手繼續(xù)順時(shí)針擰1/4-1/2圈，切記不要用力過大。如色譜柱通過流動(dòng)相加壓后有漏液現(xiàn)象，請(qǐng)用扳手繼續(xù)順時(shí)針擰1/4圈，直至不漏液為止。
標(biāo)簽: 液相色譜柱 液相色譜柱 液相色譜柱的結(jié)構(gòu)及安裝方法_液相色譜柱
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