紫外可見分光光度計(jì)可達(dá)到檢測(cè)質(zhì)量與成分的目的。在對(duì)不同的儀器進(jìn)行分析時(shí)，紫外可見光光度計(jì)是常規(guī)的分析儀器之一，原理就是紫外可見光度法。

    紫外可見光光度計(jì)有很多的特點(diǎn)：

    如第一，由于選擇性好而且靈敏度較高，維護(hù)管理很方便，所以在使用中更為常見；

    第二，它的結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單，可以很方便地進(jìn)行操作而且在成本上又不是非常貴。

    以光路設(shè)計(jì)為基礎(chǔ)，對(duì)紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行分類，可以依據(jù)光路設(shè)計(jì)分為三種類型：?jiǎn)喂馐止夤舛扔?jì)、雙光束分光光度計(jì)以及雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)。

    鑒于此，本文主要分析紫外可見分光光度計(jì)主要技術(shù)指標(biāo)及其檢定方法。

    1.紫外可見分光光度法工作原理以及相關(guān)應(yīng)用

    紫外可見分光光度法的工作原理就是利用不同物質(zhì)的分子在紫外可見光譜區(qū)上的輻射吸收的不同，利用分子的這一特性來進(jìn)行有效地區(qū)分辨別。

    紫外可見分光光度法在物質(zhì)的定性定量分析以及物質(zhì)純度分析物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析等多種方面都有著廣泛的應(yīng)用，起著不可或缺的作用。

    例如：此種檢測(cè)方法在食品行業(yè)中的運(yùn)用，可以對(duì)食品的質(zhì)量進(jìn)行有效地安全監(jiān)測(cè)。而對(duì)于生活質(zhì)量方面來說，食品衛(wèi)生及質(zhì)量是較為重要的一點(diǎn)，只有確保食品不會(huì)出現(xiàn)安全問題，才能夠有效地促進(jìn)國(guó)民健康生活。

    現(xiàn)階段，我國(guó)出現(xiàn)的食品安全問題有以下幾種：食品造假；在食品添加對(duì)人體有害的添加劑；一些非法添加物的濫用；除了這些主要問題之外還存在食品殘留農(nóng)（獸）藥、微生物或者重金屬等有害物質(zhì)的情況，以上情況都會(huì)造成食品出現(xiàn)質(zhì)量安全問題，因此必須對(duì)食品進(jìn)行安全分析、檢測(cè)，確保食品不會(huì)出現(xiàn)質(zhì)量安全問題。

    2.紫外可見分光光度計(jì)主要技術(shù)指標(biāo)

    波長(zhǎng)準(zhǔn)確度及其檢定方法

    波長(zhǎng)的實(shí)際測(cè)定值和理論值相減，就是紫外可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度。它在測(cè)試不同的儀器時(shí)，作用非常大，是非常關(guān)鍵的技術(shù)指標(biāo)。

    在我國(guó)，計(jì)量檢定工作，波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是很重要的。檢定紫外可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度有很多的方式，下面將通過兩種方法進(jìn)行壽命說明：汞燈和氖燈的利用。

    汞燈

    我國(guó)在對(duì)紫外分光光度計(jì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度進(jìn)行檢定時(shí)，很多的生產(chǎn)廠一般都廣泛利用汞燈進(jìn)行測(cè)試。具體的操作流程就是：

    將原光源拆下來，采用標(biāo)準(zhǔn)燈，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)光源燈各條的特征譜線進(jìn)行測(cè)試，波長(zhǎng)準(zhǔn)確度就是測(cè)量值和理論值做差。

    自利用汞燈進(jìn)行測(cè)試的過程中，能量測(cè)量作為測(cè)量的方式，波段的范圍設(shè)置在245-560nm范圍之內(nèi)，空氣作為樣品的參考系，光譜帶的寬設(shè)置為2nm，再通過波長(zhǎng)掃描。波長(zhǎng)準(zhǔn)確度就是汞燈的各特征波長(zhǎng)的測(cè)量值和其相應(yīng)的理論值之差。為了確保準(zhǔn)確度，可以重復(fù)進(jìn)行3次，波長(zhǎng)準(zhǔn)確度就選擇3次的平均值。

    氖燈

    在對(duì)紫外可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，通常人們?cè)谶x用標(biāo)準(zhǔn)燈時(shí)用氖燈。在儀器紫外區(qū)，由于氖燈的連續(xù)光譜優(yōu)勢(shì)，就會(huì)在紫外區(qū)作為光源。

    在可見區(qū)，由于光譜中波長(zhǎng)為656.1nm和為486.0nm是很容易分離的，而且具有高的強(qiáng)度，譜線特征非常明顯，所以對(duì)儀器波長(zhǎng)準(zhǔn)確度進(jìn)行檢定時(shí)可以利用譜線。在我國(guó)，對(duì)于儀器進(jìn)行計(jì)量檢定都會(huì)用波長(zhǎng)準(zhǔn)確度較為高的標(biāo)準(zhǔn)燈-氖燈。

    波長(zhǎng)重復(fù)性及其檢定方法

    多次測(cè)試波長(zhǎng)之后數(shù)據(jù)符合程度，也就是多次測(cè)試波長(zhǎng)的數(shù)據(jù)離散性就是波長(zhǎng)的重復(fù)性(WavelengthRepeatability)。檢定波長(zhǎng)的重復(fù)性方法，操作簡(jiǎn)單。第一種方法，測(cè)試波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度之后，測(cè)試三次取平均值，波長(zhǎng)重復(fù)性就是通過和3次測(cè)試中最小值或者最大值做的差；第二種，測(cè)試波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度，要經(jīng)過3次測(cè)試，波長(zhǎng)重復(fù)性就是最大值與最小值之差。

    光度準(zhǔn)確度及其檢定方法

    光度的實(shí)際測(cè)定值和理論值之差就是光度準(zhǔn)確度(PhotoMtricAccuracy)。它倆之間的差越小，測(cè)量就會(huì)更準(zhǔn)確，光度的準(zhǔn)確度就會(huì)更高。一般，表示紫外可見分光光度計(jì)光度的準(zhǔn)確度有以下兩種方式：

    ①透射比誤差或者透射比準(zhǔn)確度（TransmittanceAccuracy)，表示用TA(或AT);②吸光度誤差（AbsorbanceError)或者是吸光度準(zhǔn)確度(Absorbd-nceAccuracy)，在表示用AA(或AA)時(shí)，要注意測(cè)量時(shí)具體的吸光度情況。

    3.紫外可見分光光度法的合理化運(yùn)用

    溶液中物質(zhì)含量的測(cè)定

    應(yīng)用紫外可見分光光度計(jì)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液和未知液的吸光度進(jìn)而進(jìn)行比較；也可先測(cè)出不同濃度標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在一定濃度范圍內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)曲線為直線，然后測(cè)定出未知液吸光度，即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到其對(duì)應(yīng)濃度。

    化合物的鑒定

    用不同波長(zhǎng)的單色光分別通過某一濃度溶液，測(cè)定每一種單色光的吸光度，之后分別以波長(zhǎng)和分光度作為橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)，繪制得到吸收光譜曲線。

    不同食品有其特定的吸收光譜曲線，借此可以鑒定食品種類。紫外吸收光譜分析主要用于已知物質(zhì)定量分析，測(cè)定化合物中含有微量的具有紫外吸收的雜質(zhì)。

    反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研宄

    借助于分光光度法可得出特定化學(xué)反應(yīng)速度常數(shù)，借此從兩個(gè)或兩個(gè)以上溫度條件下的速度數(shù)據(jù)得出反應(yīng)活化能。

    絡(luò)合物組成和穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定金屬離子可與有機(jī)物形成絡(luò)合物且在紫外可見區(qū)有吸收，據(jù)此可利用分光光度法來研宄其組成。

    總之，紫外可見分光光度法是利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射的吸收來進(jìn)行分析的一種儀器分析，這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價(jià)電子和分子軌道上的電子在電子能級(jí)間的躍遷。

    朗伯-比耳定律是光吸收的基本定律，是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。紫外可見分光光度計(jì)在食品檢驗(yàn)中應(yīng)用廣泛，主要包括定量、定性和結(jié)構(gòu)分析以及反應(yīng)動(dòng)力學(xué)和溶液平衡研宄。

    紅外分光光度計(jì)是目前石油化工、醫(yī)藥衛(wèi)生等諸多行業(yè)進(jìn)行物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析的一個(gè)重要工具。

    紅外分光光度計(jì)的基本原理：

    由光源發(fā)出的光，被分為能量均等對(duì)稱的兩束，一束為樣品光通過樣品，另一束為參考光作為基準(zhǔn)。這兩束光通過樣品室進(jìn)入光度計(jì)后，被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制，形成交變信號(hào)，然后兩束光和為一束，并交替通過入射狹縫進(jìn)入單色器中，經(jīng)離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上，色散并通過出射狹縫之后，被濾光片濾除高級(jí)次光譜，再經(jīng)橢球鏡聚焦在探測(cè)器的接收面上。探測(cè)器將上述交變的信號(hào)轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號(hào)，經(jīng)放大器進(jìn)行電壓放大后，轉(zhuǎn)入A/D轉(zhuǎn)換單位，計(jì)算機(jī)處理后得到從高波數(shù)到低波數(shù)的紅外吸收光譜圖。

    用戶在使用紅外分光光度計(jì)時(shí)需要注意：

    1、使用之前把廠家附帶的使用說明書熟讀一遍，以便能夠?qū)⑵洳僮鞯木唧w流程以及注意事項(xiàng)有一個(gè)大致的了解。另外，在操作紅外分光光度計(jì)之前還要注意對(duì)其整個(gè)儀器進(jìn)行較為細(xì)致的檢查，如果發(fā)現(xiàn)檢查該光度計(jì)無任何問題時(shí)就可以放心的使用了，但如果是發(fā)現(xiàn)其儀器有問題則應(yīng)該及時(shí)的與商家進(jìn)行聯(lián)系，切勿在不懂的情況下對(duì)其進(jìn)行修理。

    2、使用時(shí)一定要注意按照開機(jī)、校正、檢測(cè)樣品、保存數(shù)據(jù)、取出樣品、復(fù)位、關(guān)機(jī)等正確的步驟對(duì)其進(jìn)行有序的操作，并且用戶要輕輕的操作儀器，避免對(duì)其進(jìn)行胡亂的拍打或劇烈撞擊。另外，在使用的過程中一定要注意不能擅自對(duì)紅外分光光度計(jì)進(jìn)行調(diào)整，更不能拆卸其中的零件。

    3、在每次樣品測(cè)定結(jié)束后要注意保證紅外分光光度計(jì)設(shè)備干凈整潔，尤其是對(duì)于不小心殘留在儀器表面的液體要及時(shí)的清理干凈，同時(shí)還要注意將其儀器的所在房間打掃干凈。另外，不使用紅外分光光度計(jì)一定要記得將其電源開關(guān)及時(shí)的關(guān)掉。

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