1、流動相的要求:
高效液相級色譜醇,二次蒸餾水,緩沖鹽一定要過濾;流動相脫氣至關重要(可采用抽濾,超聲波脫氣等方法)
2、吸濾頭:
特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流動相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗;清洗不成功則需要更換。
3、單向閥:
如遇到泵壓不穩(wěn)或流動相不能抽取,則可能是單向閥出現問題,卸下用異丙醇超聲波清洗,清洗時須按其安裝的方向放置在小燒杯中,切記不可與安裝方向倒置超洗!
4、泵頭:
泵頭漏液或出現其它故障一般要申請維修(如漏液,或更換柱塞桿及其密封墊等)
5、過濾器:
當色譜峰出現異常情況時,有可能是此部件被污染,拆下用異丙醇超洗或更換過濾墊片。
6、排液閥:
此處不能完全密封或漏液時一般是其中的墊片污染或磨損,可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。
7、手動進樣器:
平時應注意用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進樣分析狀態(tài)清洗;如出現漏液現象,原因極可能為轉子密封墊磨損或污染,一般須申請維修或更換配件。
8、流通池:
在色譜峰不正常時會可能是此部件補污染??刹鹦逗笕〕銎渲械膲|片用異丙醇超洗(可根據說明書進行操作或申請維修)。
9、工作站:
出現死機可重起計算機;不正常運行時,首先可更換電腦測試其硬件故障;或在本機上重新插拔接口、重新安裝軟件。
高效液固色譜儀是利用樣品各組分在固定相和流動相中吸附-解吸作用的差異,使各組分在作相對運動的兩相中反復多次受到吸附-解吸作用而達到相互分離。
主要類型:
液固吸附色譜
1.1分離原理液固色譜是基于各組分吸附能力的差異進行混合物分離的,其固定相是固體吸附劑。
1.2固定相;吸附色譜固定相可以分為極性和非極性兩大類。
1.3流動相;流動相要求:
1.3.1選用的溶劑應當與固定相互不相溶,并能保持色譜柱的穩(wěn)定性
1.3.2選用的溶劑應有高純度,以防所含微量雜質在柱中積累,引起柱性能的改變。
1.3.3選用的溶劑性能應與所使用的檢測器相匹配,如果使用紫外吸收檢測器,就不能選用在檢測波長下有紫外吸收的溶劑;若使用示差折光檢測器,就不能用梯度洗脫。
1.3.4選用的溶劑應對樣品有足夠的溶解能力,以提高測定的靈敏度。
1.3.5選用的溶劑應具有低的黏度和適當低的沸點。
1.3.6應盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑,以保證工作人員的安全
1.4應用:液固色譜是以表面吸附性能力為依據的,所以它常用于分離極性不同低的化合物,也能分離那些具有相同極性基團,但數量不同的樣品。
液液分配色譜
1.1分離原理;分配色譜法的原理與液液萃取相同,都是分配定律。
1.2固定相;分配色譜固定相由兩部分組成,一部分是惰性載體,另一部分是涂漬在惰性載體上的固定液。
1.3流動相;分內色譜中,要求流動相盡可能不與固定液互溶
1.4應用;既能分離極性化合物,又能分離非極性化合物。由于不同極性鍵合固定相的出現,分離的選擇性可得到很好的控制。
鍵合相色譜
1.1分離原理
1.1.1正鍵合相色譜分離遠離:使用的是極性鍵和固定性,溶質在此類固定相上的分離機理屬于分配色譜。
1.1.2反鍵合相色譜分離原理:使用的是極性較小的鍵合固定相,其分離機理可用疏溶劑作用理論來解釋。
1.2固定相;按極性大小可分為非極性、弱極性、極性化學鍵合固定相三種。
1.3流動相
1.3.1正鍵合相色譜中,采用和反相液液分配色譜相似的流動相,流動相的主體成分為己烷或庚烷。
1.3.2反相鍵合相色譜中,流動相采用和反相液液分配色譜相似的流動相,主題為水。
1.4應用
1.4.1正鍵合相色譜法的應用:多用于分離各類極性化合物如染料、炸藥、多巴胺、氨基酸等;
1.4.2反鍵合相色譜法的應用:由于操作簡單,穩(wěn)定性和重復性好,該方法已成為一種通用型液相色譜分析方法。在生物化學、醫(yī)藥研究、食品分析和環(huán)境污染分析等多個領域有了很大的應用和發(fā)展。
凝膠色譜
凝膠色譜又稱分子排阻色譜,它是按照分子尺寸大小順序進行分離的一種色譜方法。凝膠色譜法的固定相凝膠是一種多孔性的聚合材料,有一定的形狀和穩(wěn)定性。根據所用流動相的不同,凝膠色譜法可以分為兩類:即用水溶劑做流動相的凝膠過濾色譜法(GFC)與用有機溶劑如四氫呋喃做流動相的凝膠滲透色譜法(GPC)。
高效液相色譜儀可以完成二元高壓梯度洗脫,也可以拓展為制備系統,采用高壓混合器連接兩個高壓恒流泵,利用RS232通訊,即可實現梯度分析;
便于用戶自由選擇與搭配,混合器材主要由不銹鋼、生物惰性PEEK等構成,用途廣泛;
可廣泛應用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗、食品檢測、化工分析、環(huán)境監(jiān)測等眾多分析領域。
高效液相色譜儀分離原理:液-液分配(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化學鍵合相色譜(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流動相和固定相都是液體。
流動相與固定相之間應互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個明顯的分界面。
當試樣進入色譜柱,溶質在兩相間進行分配。達到平衡時,高效液相色譜儀報價,服從于高效液相色譜計算公式;
6種定量計算方法:歸一法、修正歸一法、帶比例因子的修正歸一法、內標法、外標法,高效液相色譜儀適用范圍,以及指數計算法。
高效液相色譜儀特點:
1、梯度洗脫內部軟件可自控制,編輯、存貯60個梯度方法,運行復雜的梯度程序;
2、泵形式:串聯雙柱塞 浮動式密封圈;泵頭自沖洗功能,泵無須手動排空即可輸液“自吸式單向閥”技術,可延長密封圈使用壽命;
3、光路系統采用精密定位結構和獨特的散熱技術,高效的光學系統和數字過濾;
4、程序化的溶劑類和壓縮因子,可自動補償;完整的預清洗功能,更于快速溶劑更換;
5、波長調節(jié)功能:既可由鍵盤面板控制也可由程序軟件設定,全封閉集成型光電檢測元件,無需任何機械部分調整即可選擇或改變波長;
6、光源運行時間在線監(jiān)測并顯示,方便用戶確定光源壽命;
7、三條流量校正曲線以及特有的多點參數校正,保障了極高的流量準確性;
8、梯度:高壓2-3元;梯度方式:高壓,梯度洗脫內部軟件可自控制,可通過PC機及泵控制;
9、實時顯示樣品池和參比池能量,方便判斷光源和流通池狀態(tài);
10、紫外檢測器具有自動波長定位調整,自動調零,多量程輸出選擇;
11、智能化高,可實現網絡化平臺監(jiān)控,提高了你的QC效益;
12、自動化,讓你從繁鎖的分析操作中解放出更多的時間。
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